本发明公开了一种用于检测肌氨酸的生物传感器及其制备方法和应用,包括工作电极,工作电极包括玻碳电极表面包覆有MoS2层、信号标志段和与肌氨酸特异性结合的捕获探针ssDNA;捕获探针ssDNA固定在MoS2层上,信号标志段为含修饰ssDNA且标记有二茂铁的SiO2粒子信号标志段通过修饰ssDNA与捕获探针ssDNA连接。本发明的生物传感器,灵敏度高,对肌氨酸的检测限低,检测方便,特异性好,应用前景好;工艺简单,条件温和,成本较低,极具应用前景。