本发明公开了一种电位型有机磷农药生物传感器用酶膜及其制备方法。本发明先制备脱乙酰基魔芋葡甘聚糖的溶胶,然后将脱乙酰基魔芋葡甘聚糖溶胶与乙酰胆碱酯酶混合,滴涂于聚碳酸酯核孔膜上,待溶胶凝固后即得到酶膜。本发明的有益效果在于:采用本发明制备的酶膜表面平整光滑,机械强度高,柔韧性好,耐酸及有机溶剂。该酶膜用作电位型有机磷农药生物传感器的测试条,具有很好的一致性和稳定性。