本发明公开了一种电位型有机磷生物传感器及其制备方法。该生物传感器用于有机磷农药的快速检测。本发明采用脱乙酰基魔芋葡甘聚糖溶胶包埋法将乙酰胆碱酯酶固定在聚对苯二甲酸乙二醇酯有机核孔膜基体材料上,再将制备的酶膜用‘O’形圈固定于pH计的玻璃电极上,即制得有机磷农药生物传感器。该方法制备的有机磷农药传感器具有灵敏度高、响应快、成本低的特点。