本发明涉及基因工程技术领域的硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码硝酸盐还原酶催化亚基及电子转移亚基的核苷酸序列;然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1,最终获得重组共表达载体pETDuet‐NB‐NA;之后将该硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现硝酸盐还原酶体外的大量表达合成,对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。
上海交通大学
周培 | 冯海玮 | 孙玉静 | 支月娥 | 唐冬 | 卫星 | 罗艳青 | 毛亮
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