本发明提供了一种构建乳酸生产菌株的方法、乳酸生产菌株及其应用。本发明的构建乳酸生产菌株的方法,其特征在于,对出发菌株进行基因工程改造以提高乳酸产量,其中所述改造包括:1)引入乳酸合成途径;2)优化乳酸合成途径;3)抑制副产物合成途径。通过本发明的方法构建得到的乳酸生产菌株可用于高效地生产高手性纯度的L‑乳酸或D‑乳酸,非常适合于乳酸的工业化生产。 上海交通大学 许平 | 刘炯钦 | 陶飞