一种基于Cas12aVIP检测胶孢炭疽菌的引物、试剂盒及检测方法

本发明公开了一种基于Cas12aVIP检测胶孢炭疽菌复合种菌群的引物和试剂盒及检测方法，包括RPA上游引物、RPA下游引物、crRNA引物和单链DNA序列，依次如SEQ ID NO：1‑4所示，还提供了试剂盒，包括基于Cas12aVIP检测胶孢炭疽菌复合种菌群的引物、Cas12a切割酶、缓冲液、RNase抑制剂、PMNT溶液；本发明还提供了检测方法：分别建立RPA反应体系和Cas12a介导的附属切割反应体系，结合PMNT溶液与体系中ssDNA的颜色变化检测。本发明建立了炭疽病菌的监测技术体系，可在40分钟内完成样品检测，操作简便，对炭疽病的早期诊断、预警和防控具有重要的意义。
上海市农业科学院
张丽勍 | 蒋玮 | 方献平 | 邹小花 | 施春晖 | 周小进